Diferencia entre RT-PCR y QPCR

Reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa (RT-PCR)

RT-PCR vs. QPCR

Los avances en biotecnología han resultado en el descubrimiento de varias formas de hacer frente a las demandas de trasplantes de órganos a lo largo de los años. Antes, un individuo que donaría voluntariamente cualquier órgano inmediatamente después de la muerte a un paciente necesitado solo podría impulsar la operación de los trasplantes. Los estudios y la investigación continuos de los biólogos conducen al descubrimiento de las células madre.

Las células madre se refieren a las que se toman del ADN de un embrión, que servirá como fuente de regeneración de células que básicamente sería un clon del órgano donde se ha recuperado el ADN. Si bien los activistas de los derechos humanos presionan para detener tales procedimientos, las operaciones exitosas han demostrado la efectividad de los desarrollos de células madre en los trasplantes de órganos.

Sin embargo, antes de que uno pueda apreciar y comprender completamente las células madre, es necesario familiarizarse con las diferentes terminologías asociadas con este descubrimiento científico. El cultivo de células madre trata con el ADN y su codificación. Por lo tanto, es vital que los estudiantes o cualquier persona interesada en el campo diferencie entre RT-PCR y QPCR.

La reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa (RT-PCR) es una de las muchas variantes de la reacción en cadena de la polimerasa, o PCR. Esta técnica de laboratorio se usa ampliamente en biología molecular para que los científicos produzcan múltiples copias de una secuencia de ADN particular a través de un proceso acuñado como "amplificación."La diferencia entre RT-PCR y PCR tradicional es que el ARN se transcribe primero en reversa en su complemento de ADN, que utiliza la transcriptasa inversa. El nuevo ADN complementario que contiene la transcripción invertida se amplificará utilizando la PCR tradicional o la PCR en tiempo real.

La mayoría de los estudiantes que estudian este proceso a menudo cometen el error de intercambiar PCR de transcripción inversa y PCR en tiempo real, ya que los dos se abrevian de manera similar. Para evitar confusiones, los biólogos etiquetan la PCR en tiempo real como PCR cuantitativa en tiempo real o QPCR.

QPCR difiere mucho de RT-PCR, ya que QPCR es responsable de medir la amplificación a medida que ocurre. Se puede decir que RT-PCR inicia el proceso de amplificación, mientras que QPCR lo mide a medida que tiene lugar el procedimiento.

PCR cuantitativa en tiempo real

QPCR en realidad ha revolucionado el método de enfoque unidireccional tradicional cuando se trata de cuantificar el ADN y el ARN, ya que la aplicación del método QPCR hace posible que los biólogos determinen la concentración inicial del ácido de los núcleos incluso antes de que se hayan observado los resultados de la reacción y anotado.

La aplicación de QPCR, que ahora se considera la técnica de análisis más potente y sensible para los estudios genéticos, se ha ampliado significativamente. Actualmente participa en el análisis cuantitativo de la expresión génica, el genotipado, la detección de patógenos y el análisis de SNP, junto con las mediciones de interferencia de ARN.

QPCR a menudo se combina con el proceso de transcripción inversa para cuantificar el ARN mensajero y el microARN presente en las células de los tejidos observados y experimentados con. Esto luego da otra diferencia visible entre los dos: RT-PCR puede usarse para el proceso de amplificación, pero debe fusionarse con QPCR para fines de cuantificación.

También se sabe que QPCR es más cuantitativo ya que los datos pueden recopilarse a medida que avanza la fase de crecimiento exponencial (log) de la PCR. Los biólogos señalan que la cantidad del subproducto de la PCR es directamente proporcional a la cantidad de ácido nucleico de plantilla que se medirá a través de QPCR.

Por otro lado, RT-PCR está lejos de tener una naturaleza cuantitativa, ya que la observancia de la intensidad de la banda amplificada en un gel después del estándar establecido de una concentración puede llevar a tener inferencia "semicuantitativa".

Resumen:

1.QPCR y RT-PCR son términos utilizados en biotecnología y se utilizan para la producción de múltiples copias de ADN.
2.RT-PCR se usa para amplificar la transcripción invertida del código de ADN; QPCR mide la amplificación.
3.RT-PCR es para amplificación, mientras que QPCR es para cuantificación.
4.QPCR es de naturaleza cuantitativa, mientras que RT-PCR no es.